Bicara Tentang Kulat... Pening..!!!!

Kita patuhi Perintah kawalan Pengerakan, bukan bererti tidak bergerak-gerak berkurung dalam rumah, dok makan minum tidur aja sepanjang hari, berlumut punggong dijangkiti kulat. Kita sudah hampiri bulan puasa dan hari raya akan tiba sekiranya Allah panjangkan umur, kita lakukan apa yang patut, membersih kawasan rumah, menebas semak samun berhampiran jalan masuk kerumah sebelum bulan puasa tiba dan sebagai amalan senaman setiap pagi. Apa-apa pun setiap hari wajib badan keluarkan peluh agar kita sentiasa dalam keadaan sihat.

Kebiasaannya setiap pagi kehutan dan ada ketika menyepi diladang gaharu, kini pergerakan terkawal tidak boleh lintasi sempadan dan cuma curi-curi masuki hutan berhampiran rumah. Saya gemar suntik pokok gaharu liar yang tumbuh dikebun getah, dusun-dusun buahan dan diladang kelapa sawit hak milik persendirian dan tidak sesekali mengusik pokok ini yang tumbuh dihutan simpanan kekal.

Saya terangkan disini sebagai dedahan agar mengetahui pada orang-orang yang tersalah anggap, mengatakan saya suntik pokok gaharu dihutan simpan. Diserata lokasi tempat saya menetap dan dearah-dearah berhampiran ini, memang mudah ditemui pokok gaharu liar ini yang tumbuh ditanah hak milik persendirian. Jumlah besar pokok spesis ini saya perolehi secara percuma, adakalanya memberi duit kopi pada pemilik dan mendapat kelepasan keluar masuk kekawasan ini tanpa ada sekatan serta masa tidak dihadkan untuk saya lakukan kerja-kerja berkaitan.

Sejumlah besar pokok-pokok liar diperolehi belum lagi dilakukan inokulasi dengan ukuran pelbagai saiz daripada sebesar paha sehingga tiga pemeluk. Sebelum kerja-kerja inokulasi dilakukan ada perkara penting harus diselidiki, antaranya status hak milik, pengambilan tanah dan usia pajakan tanah. Ini melibatkan pelaburan wang tunai walaupun hanya disuntikan cecair kulat pada batangnya, setiap segi kena teliti, tersilap percaturan kita.

Kikikikiki.. Manusia zaman sekarang, jangan mudah dipercayai, hari ini cakap lain esok cakap lain, lebih lagi melibatkan duit, semuanya boleh lupa walaupun berjanji sekalipun dan ada-ada alasan contohnya, ok bulan 3 nanti, oh sorry bulan 11, oh tak dapat lagi, bulan 3 tahun akan selesai, masuk bulan 3, itu ini begitu begini, terus kehampaan. (*Yang terasa tu sorry lah, engkau yang beria-ia berjanji dan tunai tak mahu, kau tanggunglah).

Seawal bergiat dibidang gaharu teknologi, sememangnya buta dan tuli. Untuk dapatkan maklumat, permulaan belajar mengenali teknik-teknik inokulasi, teori mana boleh dipakai, bagaimana untuk cara amali yang betul untuk memulakan kajian dan segala urusan berkaitan berdasarkan gaharu teknologi, amat pening untuk memikirkannya. Bermula belajar mengenal apa itu Bioteknologi, Microbiologi, patologi, mikrob inoculation dan lainnya entah apa-apa benda, berbelit-belit lidah nak menyebutnya.

Pada awalnya saya sendiri pun kurang memahami, berjanji mesti lakukan kajian, bila terhasil dari kajian. Alhamdulillah, walaupun belum sempurna, boleh dikatakan berbaloi hasilnya daripada bertukus lumus tulang empat kerat, bercengkang mata, bagai nak pecah kepala otak memikirkan bagaimana mahu memecah huraian teori serta formula, sehingga sampai kematu tapak tangan melakukan kerja-kerja amali dan bergetar-getar kepala lutut memanjat pokok gaharu setiap kali melakukan kajian.

Cakap mengikut teori memang senang, spesis kulat sahaja yang mampu menghasilkan gaharu, cuba engkau lakukan, kita sama-sama tengok hasilnya setelah tempoh 3 bulan. Tersiilap haribulan spesis kulat yang disuntik pada pokok gaharu itu boleh menyebab tidak terhasil gaharu.  Kikikiki.. jadi saintis lah, kita. Pengkaji vaksin dan pereka teknik penginokulasian, vaksin haram jadah apa, kalau bergitu keputusannya..?. Memang betul, semua spesis kulat mampu mereputkan kayu ketika kayu berada didalam keadaan basah, tetapi bukan semua daripada spesis kulat segar ini mampu membentuk gaharu.

Ketika pembentangan hujah secara lisan, saya nyata pelbagai spesis kulat dalam bentuk cecair akan terhasil melalui bahan-bahan mentah, telah saya temui setelah melalui kajian bertahun-tahun dan ada pertanyaan “ Bagaimana caranya dan apa bahan-bahan utama..?” Saya menjawab “ Anda wajib mengkaji sendiri dari awal, dari semua factor pokok gaharu, bagi menghasilkan gaharu microbiologi, bagaimana pokok stress dan bagaimana ianya allergic, peranan aktiviti mikrob inoculations wajar atau wajip dilakukan bagi penghasilan oleoresin (sel-sel berkanji).

Bahan-bahan serta formula vaksin saya, tetap menjadi perkara rahsia bagi saya sebagai seorang pengusaha, tidak mesti sesekali akan didedahkan pada mana-mana pihak. Group anda telah mengkaji daripada penggunaan pelbagai-bagai sel-sel, jisim-jisim, ada teknologi serta mempunyai makmal yang canggih dan anda juga telah memcuba gabungan spesis-spesis kulat dan bacteria baik, biokimia, mikrobiologi dan semasa kajian anda pula mengikut teori, factor yang anda temui demi mencapai matlamat kan?”.

Kulat-kulat yang paling kerap ditemui dimakmal setelah pengasingan dilakukan, yang sering menjangkiti pokok gaharu, contohnya seperti Pencillium citrinum, Aspergillus tamarii, Aspergillus spp, Fusarium solani, Botryodiplodia theobromae dan lain-lain. Keputusannya kita mahu mencari sepsis-spesis kulat selamat digunapakai serta mampu menghasilkan oleoresin wangi, bukan menghasilkan oleoresin bila dibakar berbau hangit kayu terbakar.

Dari kajian saya, walaupun bergitu, terlalu banyak pencanggahan pendapat tentang kulat-kulat yang ditemui diantaranya para-para pengkaji spesis kulat penghasilan gaharu, Sadgopal (1978), Hooper (1904), Battcaharya (1952), Varrna (1977), Gibson (1977), Hawksworth (1976), Jaluddin (1977).

Mengikut laporan meluas para-para pengkaji tentang pokok gaharu dijangkiti kulat (kayu dijangkiti), adalah satu penemuan bukan perkara baru, bagaimana untuk mempercepatkan pembentukan gaharu berdasarkan penyelidikan lebih intensif, contohnya spesis kulat Torule sp. berjaya digunapakai serta mempercepatkan pembentukan gaharu, tetapi rawatan dihentikan (1931) kerana percemaran inokulasi.

Manakala penggunaan Cladosporium sp. dan Epicoccum granulatum, Pancillicum citrinum, Aspergilus tamari, Fusariumsolani, Fusarium oxysparum Schlect, Fusarium tricinctum , Xylaroides Fusarium, Botryodiplodia spp. Theobromae spp. Philophora parasitica, Epicoccum sp. Chaetum fglobosurp kunze, Cylindrocarpon telah dipinggirkan pada spesis Aquilaria agallocha. Botrydiplodia theobromae, tetapi, juga ada pencanggahan pendapat, Curvularia lunata, Fasarium oxysporum dan Pestalotia adalah perasit, manakala Cercosporella sp. Chaetomium spirale, Cladosporium sp. Phialogenculata sp. Pithomyces sp. Rhizopus sp. Spiculostibella sp. dan Trichoderma sp lazimnya ditemui digunapakai diThailand.

Teknik penghasilan gaharu microbiologi, antaranya, mengerudi menjadi amalan untuk membuat lubang-lubang pada batang-batang serta cabang-cabang dianggap matang, kamudianya disumbat tiup (PVC) untuk pengaliran cecair yang mengandungi cecair kulat, bertujuan mencederakan dibahagian dalam batang untuk mengelak penyembuhan secara semulajadi, teknik bergini berkesan, oleoresin mula membentuk sedikit demi sedikit, hingga menghasilkan kayu akan dijangkiti kulat, yang terbaiknya keseluruhan pokok dijangkiti berkualiti tinggi, resin tebal mengandungi minyak.

Pelbagi-bagai kulat yang berkaitan dengan pembentukan gaharu dibantu oleh serangan serangga, udara dan air hujan, tiga hipotesis wujup mengenai gaharu pembantukan hasil patologi, mencederakan / patologi dan / atau bukan proses-proses patologi (tiada maklumat tepat). Oldfield (1998) menyatakan penghasilan resin terjadi kerana tindak balas jangkitan kulat dan manakala Beek (2000) pula berkata bahawa tindakbalas kepada mencederakan menghasilkan oleorasin.

Pengulasannya, jangkitan kulat boleh meningkatkan pengeluaran oleoresin sebagai tindakbalas kepada peningkatan, kerosakan dan pertumbuhan kulat terhadap pokok gaharu secara semulajadi dijangkitan oleh pelbagai-bagai kulat termasuk, Aspergillas spp. Botryodyplodia spp. Diplodia spp. Fusarium balbiferum, fasarium laterium, fasarium oxysporium, fasarium solani, Penicillium spp dan Pythium spp. ( Anan 1998, Soehartono dan wiriadinata 1995 -1997 ) Huraian pendapat menyatakan walau bagaimanapun interaksi ekologi antara pokok dan luka dan / atau kulat untuk menghasilkan oleoresin adalah rumit.

Setiap Keadaan ada kemungkinan disebabkan oleh penggunaan kulat liar sebagai cecair pencetus oleoresin. Kulat ganas boleh menyebabkan pokok-pokok yang diserang kejam dan menghasut pada kematian pokok. Salah satu masalah dalam inokulasi juga mungkin berkaitan dengan kegagalan kulat inokulasi untuk bertindak balas kerana setiap spesis pokok mempamerkan reaksi yang agak berbeza.

Kegagalan itu juga oleh ketidak kesesuaian pathogen yang disuntik pada pokok. Kesesuaian inokulasi mikrob dengan pokok-pokok merupakan satu factor penting yang harus dipenuhi. Oleh itu, untuk menentukan kejayaan proses inokulasi adalah mengetahui pathogen microbe sebagai mikrob untuk disesuaikan dengan spesis pokok.

Dan kita memahami proses pembentukan, bermula satu bulan tempuh mengalami alahan, perubahan warna pucat berlaku, diikuti warna lebih gelap ke perubahan warna kuning-coklat selepas 3 bulan, membentuk warna coklat gelap dalam masa 8–10 bulan dan akan berubah kepada hitam dalam masa 20 bulan, dengan memberikan aroma apabila dibakar. Perbandingan dilakukan antara pokok-pokok yang dirawat atau cedera pada 10, 15 dan 20 bulan antara teknik mencederakan ini mempunyai perbezaan.

Keputusan menunjukan bahawa luka yang ditebuk mengunakan pahat, lubang-lubang diskru dan penyingkiran kulit belasah pada batang memberikan warna coklat gelap, kekuningan kepada perubahan warna coklat gelap berhampiran kecederaan, manakala paku yang ditanam pada batang memberikan perubahan warna gelap, dimana  memukul batang pula memberi hanya sedikit perubahan warna.

Kajian ini bukan perkara baru, ianya bermula lebih setengah abad yang lampau oleh institusi antarabangsa melakukan penyelidikan inokulasi tiruan. Kedua-dua tekanan fizikal dan kimia seperti luka mekanikal dan induksi telah lama diamalkan tujuan meningkatkan hasil gaharu dan inokulasi kulat. Kekhususan kulat jangkitan adalah kriteria kecil pembentukan gaharu daripada keadaan fisiologi tumbuhan, tidak balas imun dan kehadiran pencetus.

Supaya pengeluaran gaharu boleh menjadi bidang perbagai rupa prospek diNegara Asia Tenggara dan amnya diMalaysia. Penanaman pokok Aquilaria baru dan pokok-pokok Aquilaria liar dan pemilihan yang sesuai dan inokulasi harus menjadi objectif utama. Pendekatan ini merupakan disiplin dimulakan dengan bantuan pakar-pakar perhutanan, mikologi, biokimia dan mikrobiologi bagi mencapai matlamat.

Setakat ini dulu catatan terbaru ini, sakit kepala bagaikan nak pecah otak untuk menyiapkannya dan saya bukan seorang saintis untuk menghurai secara detail. Catatan terbaru ini hanya mengisi masa luang ketika PKP ini.TQ.

Kaji Selidik..!!!!

Sudah menjadi satu kebiasaan beseorangan berbasikal diawal pagi menyusul jalan serta denai kearah hutan, suasana sunyi sepi tanpa ada seorang manusia pun ditemui. Saya bukan sengaja engkar perintah kawalan pengerakan atau PKP dan sedaya upaya mengelak ketemu sesesiapa pun. Berdiam diri, duduk tanpa lakukan apa-apa amat memboringkan, kita lakukan senaman anggota badan seorang diri, agar semua urat saraf sentiasa aktif ketika melakukan aktiviti kayuhan. 

Ketika mendaki bukit dan badan akan mengeluar peluh, udara hutan tidak tercemar, aman damai, tiada virus mengoda, tidak ada tipu daya, tiada lakunan, tidak ada cacian maki hamun, sindir menyindir, sifat menjatuhkan insan lain demi kepentingan kuasa serta kepentingan poket sendiri dan yang ternampak diruang mata kita semuanya adalah reality. Betapa amannya warga hutan dengan habitat masing-masing menguasai kawasan sendiri hutan rimba dan berada dialam hutan ini, kita dapat rasai yang diri kita hanya seorang pendatang mencerobohi kawasan mereka.

Ketika berada dihutan, saya sentiasa mendapat ideal terbaru untuk terbitkan catatan terbaru blog gaharu saya dan untuk saya kongsikan sebagai maklumat.  Saya sebarkan maklumat tentang gaharu teknologi, menengahkan isu-isu, bagaimana pembentukan gaharu terhasil dan perkara yang ada hubungkait dengan gaharu, bukan bertujuan untuk melumpuhkan saingan. Anda harus fahami hakikat sebenarnya dan cuba berpaling kearah belakang “apa yang telah berlaku sebelum ini dan pandangan masyarakat pada industry gaharu sebelum ini?”.

Disini timbul kesedaran, mengapa saya berblogger?. Tujuannya tidak ada kearah lain, ingin memajukan, menyedari masyarakat, memantapkan industri dan ingin melihat para-para pengiat bejaya terus mencapai kejayaan. Jika saya hanya pentingkan diri sendiri, tidak ada guna membuang masa menghadap laptop seharian menyiapkan catatan blog ini, banyak perkara lain berkaitan yang perlu saya selesaikan lagi daripada membuang masa dan bukannya mendapat gaji setiap kali catatan terbaru diterbikkan. Betul kan?.

Jom..!!! kita sama-sama mendalami sedikit maklumat yang saya sedekahkan untuk anda. Pelbagai-bagai teknik mekanikal mecederakan telah diuji tujuan mendorong pembentukan gaharu pada spesies gaharu Aquilaria spp. Yang berusia 3 tahun keatas yang ditanam diperladangan. Kajian penyelidikan pada tahun 2001 hingga 2002 melaporkan setelah pokok-pokok ini dicederakan, membuktikan perubahan berurutan terdapat pada warna kayu ini disekitar tapak kecederaan.

Satu bulan selepas mencederakan perubahan ketara berwarna pucat berlaku, dikuti dengan perubahan warna lebih gelap kuning-coklat setelah 3 bulan, ianya menjadi perang gelap dalam tempoh 8 – 10 bulan dan akan berubah kepada hitam dalam tempoh 20 bulan dan disertai pada bila dibakar berbau manis berkayu. Sample blok kayu yang dikumpul daripada 10, 15 dan 20 bulan selepas mencederakan, telah dibandingkan ada pembezaan ketara setelah rawatan mekanikal dilakukan.

Keputusan menunjukkan bahawa lubang yang dibuat mengunakan skru, pahat, tebukan dan melalui penyingkiran kulit akan bertukar menjadi warna gelap coklat berhampiran tempat Teknik menaman skru pada batang sebagai asas kajian, menghasiilkan kayu berwarna coklat gelap kepada hitam, berlaku oleh interaksi antara oksida dan serat ferik, manakala mencederakan cara memukul sekeliling batang ianya mampu memberi perubahan hanya sedikit.

Semakin besar objek yang digunakan dan kedalaman keadaan terluka, tisu pokok Aqilaria ini akan bertukar warna lebih meluas, kadar pembentukan perubahan warna di sekeliling luka pada musin hujan (16-20 bulan selepas mencederakan) adalah 3 kali ganda lebih tinggi daripada di musin kering (11-15 bulan selepas dicederakan) kerana di pengaruhi oleh factor-factor cuaca.

Pada kajian awalnya kebanyakan rawatan mekanikal tidak memberi kesan pembentukan pada Aquilaria spp, disegi aromatic, cuma bau kayu setelah proses ujian pembakaran dilakukan pada sample kayu ujian. Kecuali, setelah kajian penyelidikan di sambung, telah temui 4 teknik rawatan kayu bertukar warna gelap dan beraroma, teknik mengerudi dengan skru (1.27 cm dan 1.11 cm diameter) dan dilukai dengan pahat (sedalam 2.54 cm).

Selain itu sample memberikan peratusan hasil tersangat rendah bagi pemprosesan minyak pati dengan menggunakan keadah penyulingan hidro. Dalam kesimpulannya, kecederaan mekanikal boleh digunakan untuk pembentukan kayu gaharu dan satu-satu keadah paling serasi atau sesuai diguna pakai mengerudi secara selang di sekeliling batang aqularia spp. Ini, ianya mampu menghasilkan perubahan warna dan berbau aromatic setelah dibakar.

Dilaporkan Aqularia spp. (Thymelaecceae) berasal dari India, Bangladesh, China, Burma dan Negara-negara Asia Tenggara serta Filipina, hanya 3 spesies daripada 15 spesies daripada genus ini ditemui di Thailand, Aquilaria Crassna, Malacensis Roxb (Agallocha Roxb) dan Aquilaria subintergra. Beberapa pokok yang dikenali dibahagiannya mampu menghasilkan aromatic berkayu, lebih dikenali gaharu atau “agar”, gaharu gaharu dan krisana ini mengandungi oleoresin telah 800 tahun diniagakan.

Selepas mencederakan Aquilaria spp Satu bulan selepas mengalami kecederaan, perubahan warna pucat berlaku, dikuti dengan warna gelap, keperubahan warna kuning ke coklat selepas 3 bulan, ia akan membentuk warna coklat gelap dalam tempoh masa 8-10 bulan dan akan berubah kepada warna hitam dalam masa 20 bulan, akan mengeluarkan aroma setelah dibakar.

Blok-blok kayu dikumpul daripada pokok-pokok yang dirawat atau dicederakan pada 10, 15 dan 20 bulan selepas rawatan, dibandingkan bagi mempastikan adakah perbezaan antara teknik mencederakan ini mampukah mengeluarkan aroma dan minyak pati berkualiti.

Keputusan menunjukan, luka yang dilakukan dengan pahat, lubang-lubang melalui skru dan penyingkiran kulit pada batang, telah memberikan warna coklat gelap kekuningan peratusan ke warna coklat gelap berhampiran kecederaan(5-10 mm dari hujung yang dipotong) manakala sekeliling lubang hingga kedalam batang memberikan perubahan warna gelap, dimana kawasan yang dicedera melalui ketukan, cuma ada perubahan warna hanya sedikit.

Pemeriksaan awal kecederaan keadah mekanikal menunjukan bahawa luka dari kuku yang dimasukkan kedalam batang (12.70 cm) mampu memberikan perubahan berwarna gelap daripada lubang yang dibuat melalui skru 1.27 cm, diameter, Tetapi, tidak mampu memberikan khusus bau aromatic apabila dibakar.

Satu kajian dijalankan (1991) bahawa peranan fisiologi udara atau oksigen merupakan factor penting pada pembentukan kayu gaharu, apabila dicederakan melalui kuku yang belasah masuk batang, tidak ada buih udara atau oksigen boleh menyerap pada luka, oleh itu, perubahan warna gelap mungkin berlaku oleh interaksi antara oksida kuku dan kayu gentian, manakala deposit oleoresin kemungkinan hanya sedikit yang berlaku.

Walau bagaimanapun, interaksi antara batang pokok dan luka atau bagaimana kulat mampu menghasilkan gaharu, kajian-kajian para penyelidik bercanggah pendapat. Factor-faktor seperti, umur pokok, perbezaan pokok disebabkan variasi bermusin, perubahan alam sekitar dan variasi genetic Aquilaria spp. Juga memainkan peranan penting dalam pembentukan gaharu, ini menunjukan bukti, bahawa tidak semua genus Aquilaria ini menghasilkan gaharu, dapat dianggarkan hanya kira-kira 10% daripada Aquilaria spp. liar menghasilkan damar (oleoresin).

Oleh itu, cuma satu per/sepuluh pokok yang matang ditemui menghasilkan gaharu pokok-pokok yang berumur dari 20 tahun  yang dijangkiti mampu menghasilkan gaharu berkualiti, yang hasil terbaiknya pokok-pokok yang berumur 50 tahun ke atas.

Kajian tahun 2000 yang dijalankan oleh Projek Hutan Hujan (TRP) di Vietnam telah menemui bahawa pembentukan gaharu boleh berlaku pada pokok ditanam seusia 3 tahun, sebagaimana pertemuan ini disahkan oleh para penganalisis kimia, hasil dan kualiti resin gaharu agak berbeza. Tahun 1995, penyelidikan telah dijalankan di West Kalimatan, indonesia, menunjukan bahawa, hasil resin Aquilaria spp tidak sesuai dengan diameter pokok atau jumlah kayu.

Aquilaria spp tidak sesuai dengan diameter pokok atau jumlah kayu. Walaupun mempunyai tanda-tanda jangkitan serupa, dengan cadangan, pokok-pokok ukuran diatas 20 cm garis pusat, aras ketinggian 3 kaki keatas yang menghasilkan gaharu, mampu menghasilkan gaharu kira-kira 1 kg setiap sepokok (mengikut teori). Universiti of Minnesota telah merevolusikan pengeluar gaharu, melalui keadah inokulasi menggunakan bahan-bahan kimia tertentu dengan kadar pembentukan gaharu bertambah.

Dokumen hak paten disediakan serta mengatakan bahawa pengeluaran melalui teknik inokulasi ini mampu meningkat kepada 30 peratus berbanding dengan 7 peratus yang pembentukannya berlaku secara semula jadi dan laporan yang lebih penting, inokulasi boleh dilakukan pada pokok-pokok berusia muda. Walaupun, pembentukan resin dianggap misteri tiada dapat di selesaikan, oleh penyiasatan penyelidikan yang berkerjasama lebih 20 tahun.

Projek Foundation hutan hujan (TRP), sebuah organisasi yang berdedikasi untuk pemeliharaan hutan hujan tropical dan dunia, memulakan kajian, mengkaji pembentukan resin dan mengkaji perkembangan dan keadah penghasilan resin pada pokok-pokok genus Aquilaria dan Grinops.

Teknik daripada mencederakan dengan cara-cara tertentu dan bagaimana mempercepatkan tindak balas pertahanan semula jadi, teknik ini juga membolehkan hasil berkualiti dihasilkan pokok-pokok muda. Mencederakan pokok gaharu dengan menggunakan bilah atau mengetuk paku kedalam batang, satu teknik bergitu meluas digunakan pada masa lalu, bagaimanapun gaharu yang dihasilkan dari rawatan ini, biasanya terlalu rendah kualiti gaharu dihasilkan dan tidak dapat memenuhi permintaan dipasaran.

Pengasingan pelbagai-bagai kulat daripada pokok-pokok yang dijangkiti telah dilaporkan secara meluas. Penemuan teknologi baru mendapat sambutan hangat, teknologi baru untuk mempercepatkan pembentukan gaharu berdasarkan mekanisme ini terus bercambah diguna pakai dan penyelidikan telah menjadi lebih intensif pada spesis kulat Torula sp, yang telah memberikan kesan dan berjaya dilakukan pembentukan resin pada Aquilaria Agallocha dan didapati mempercepatkan pembentukan gaharu. Tetapi, rawatan ini di hentikan pada tahun 1931 kerana pencermaran yang serius pada inokulasi diwaktu itu.

Kita sambung dilain kali, jika dipanjangkan umur, sihat tubuh badan dan Allah bagi rezeki, saya akan sentiasa hidupkan halaman blog gaharu ini dan akan saya mewarnai dengan maklumat sebagai paduan asas. Sekiranya ada tersalah taip, silap susunan ayat dan ada yang terasa hati dengan catatan yang yang saya terbitkan, harap memahami, kita semua bukan dilahirkan sempurna. Lagipun kita bukan berurusan hanya satu orang, sudah pasti kita berurusan pelbagai peringkat manusia dan kita menemui ratusan ragam perangai manusia. TQ.

Isk.. Aktiviti Enzim . .?

Perubahan iklim telah bermula, walaupun suasana berangin haba tetap panas, bahana kepanasan tidak terhingga dan wabak virus CODIV19 sedang merebak. Kebiasaanya diawal pagi berpeluang lepak-lepak kat warong kopi walaupun 1 jam bersama kawan-kawan, terasa rindu pula lepak sambil mendengar perbagai-bagai isu-isu terbaru. Kita bukan orang politik, bukan orang penting atau ahli JKK ke apa, kita cuma perbanyak periuk nasi dan gemar mendengar daripada menambah untuk sedapkan isu. Menjadi satu kebiasaan sebilangan tergolong ahli masyarakat kampong, berada diwarong kopi setiap pagi sambil bertanya khabar dan setelah selesai bersarapan, masing-masing akan membawa hala tujuan mencari rezeki.

Ramai kenalan rakan-rakan sama-sama bergiat dibidang ini hanya kenali dilaman social, kenal nama bersua tidak pernah sama sekali. Kenal melalui gambar yang mereka update, kemungkinan sekiranya terserempak tidak akan bertegur sapa. Kenal melalui gambar sukar untuk kita cam, kadang-kadang gambar diupdate jauh berbeza daripada wajah sebenar. Tetapi, itu tidak dikisah sangat kan?, kenal nama, jarang-jarang kita likes serta komen status pun dah cukup sebagai hubungan silaturrahim.

Seperti yang pernah saya kongsikan, saya tidak ada rakan yang begiat dibidang gaharu teknologi tinggal berdekatan dan boleh dikatakan jika ada yang bergiat dibidang ini sedaerah, memang saya tidak mengenalinya. Yang pernah dikenali hanya kalangan pengiat gaharu teknologi yang telah pencen dan kadang-kadang sesekali ada terdengar memasarkan gaharu, itupun cuma, seperti mengikut angin berlalu. Boleh dikatakan para kenalan mantan-mantan pengiat ini, jika terlihat pokok gaharu pun terasa mahu muntah oleh kerana terlampau patologi, tetapi, sayang pokok yang disuntiknya tidak mengalami patologi.

Terasa hebatnya, bila bercakap tentang teknik-teknik inokulasi dan pendedahan pembentukan gaharu semudah seperti makan kacang, senang sesenangnya, hanya mengerudi lubang dan masukan cecair dan pasti pokok akan terhasil pembentukan gaharu. Inilah topic utama yang diwarwarkan sekian lama, tetapi, tidak ada yang mengaku pernah alami kegagalan dan hanya cerita yang indah-indah dihebuhkan adalah kejayaan. Pelbagai-bagai cerita didengari padahal setelah kita menilai dari apa yang diceritakan amat meragui adalah sukar untuk dipercayai. Jauh beza dengan sifat orang yang telah berjaya, kebiasaannya mereka berdiam diri, ketawa melihat gelagat saingan barunya dan yang baru bergiat ini pula tidak ubah terlebih sudu dari kuah.

Kita teruskan tentang gaharu. Gaharu juga dikenali sebagai oud, oudh atau agar adalah berwarna gelap resin heartwood yang membentuk dalam pokok Aquilaria dan Gyrinops, apabila dijangkiti melalui acuan kulat. Sebelum dijangkiti, heartwood adalah ringan dan berwarna pucat. Walau bagaimanapun, setelah jangkitan berlaku, pokok menghasilkan damar gelap aromatic melalui tindakbalas kepada serangan itu, yang menyebabkan bertukar warna gelap, sebagai damar padat yang tertanam dalam heartwood.

Hanya mitos mengatakan jika terlewat ditebang gaharu akan hilang, ianya terjadi kerana penyembuhan disebabkan cecair penyerang terlalu lemah atau cecair disuntik kedalam batang pokok ini tidak mengandungi sebarang kulat berkaitan. Walaupun pelbagai-bagai teknik kecederaan dilakukan, isyarat kecederaan ini diterima, tetapi, kelemahan cecair kulat tidak mampu bertindak sebagai serangan ganas yang mampu melepasi pertahanan sequiterpernes. Gabungan bahan-bahan terkandung dalam cecair pengalak adalah antara gabungan spesis kulat dan setelah dicampurkan ianya menghasilkan pembiakan ribuan bakteria atau menghasilkan ribuan nescules baru.

Daripada hasil kelemahan cecair yang digunakan, factor utama yang kita boleh menilaikannya, tempuh 3 bulan ianya memberikan keputusan amat mengalakan dan sehingga 12 bulan. Tetapi, setelah tempuh 2 tahun penyembuhan boleh dilihat dengan jelas. Kebiasaannya sekitaran lubang terdedah ianya memaparkan warna agak hitam nipis, yang pasti resin tidak membentuk seperti diharapkan dan hasilnya tidak berbaloi untuk pulangan modal pelaburan.

Berwarna gelap itu gaharu dan berwarna pucat pudar itu adalah kayu gaharu, ianya membentuk melalui kecederaan melalui kejadian alam semulajadi dan dicederakan melalui campur tangan manusia. Daripada kecederaan ini maka sebagai permulaan serangan palesit atau kulat-kulat, gaharu adalah produck patologi, mengandungi bahan-bahan kimia walaupun bagaimana pun pembentukannya agak rumit untuk kita difahami dan daripada asasnya pembentukan gaharu terhasil daripada serangan kulat.

“Boss mengapa pokok yang saya inokulasi tidak menghasilkan pembentukan gaharu?”. Peranan cecair pengalak merupakan peranan utama sebagai penyerang atau sebagai wabak pencetus serangan, manakala sequitepernes adalah benteng pertahanan. Sekiranya penyerang bersifat lemah ini hanya berjaya melakukan serangan tempuh masa singkat dan penyembuhan akan berlaku. Faktor penting kita memerlukan bahan-bahan yang akan diproses sebagai cecair pengalak itu mampu menghasilkan kulat-kulat yang ada hubung kait dalam pembentukan gaharu. Teknik-teknik inokulasi juga merupakan teknik-teknik mencederakan dan ia juga merupakan salur-salur atau lubang bagi memasukan bendair itu tadi.

Resin yang dihasilkan oleh pokok ini sebagai tindakbalas kepada serangan kulat-kulat atau mikrob dan walaupun pokok muda boleh didorong untuk menghasilkan gaharu melalu jangkitan dan inokulasi. Pelbagai-bagai kulat yang berkaitan ditemui dengan pembentukan gaharu, tetapi tidak ada tanda jelas mana-mana kulat yang membuat pokok aquilaria ini menghasilkan gaharu. Gaharu terhasil daripada tindakbalas kepada jangkitan kulat, pokok menghasilkan resin yang tinggi dalam sebatian organic meruap yang membantu dalam membenteras pertumbuhan kulat.

Para pengkaji telah berjaya mengasingkan 3 jenis spesis kulat daripada resin daripada gaharu semulajadi. Diantara teknik inokulasi pula mengunakan gerudi untuk membuat lubang kecil dibatang, mengunakan pasakan buluh dan kayu yang telah dijangkiti dibelasah pada batang pokok Aquilaria ini. Ianya bertujuan penanaman bakteria kulat supaya kulat-kulat ini menyebarkan atau menyerap melalui tisu pokok. Maka ianya berlakunya kereputan dibahagian aliran penyerapan dan kejadian begini mengambarkan cecair pengalak bersifat kekejaman yang sepatutnya.

Kita beralih pada kajian saintifik pula. Aktiviti selulase, pectinase, peroxidase dan polifenol oksidase ditentukan pada pokok dalam keadaan sihat, pada bahagian tumbuhan semula jadi yang dijangkiti dan disuntik secara bersilang, sebagai kajian perubahan dalam aktiviti-aktiviti enzim sebagai patogenis. Keluarga Thymalaeaceae mengandungi oleoresin wangi ini, juga dikenali sebagai “agar”, Agar atau gaharu dianggap sebagai produk patologi yang dihasilkan oleh serangan kulat (atau kayu dijangkit), sebilangan besar para penyelidik melaporkan pembentukkan “agar” dan dilaporkan bahawa zon “agar” berkaitan dengan acuan dan kulat yang mereput kayu.

Antara spesies kulat yang berbeza-beza dikaitkan dengan zon “agar”, telah mempamerkan pathogenesis, manakala yang lain seolah-olah hanya saprophytic, antara salah satu gejala-gejala yang ditemui dalam penyakit disebabkan kulat adalah tidak terurus pada tisu kayu yang dibawa oleh enzim yang diserapkan melalui pathogen ketika menyerang luka-luka pada pokok. Perubahan dalam cellulolytic dan pectinolytic aktiviti enzim dalam pathogenesis mengikut kajian, peningkatan dalam peroxidase dan polifenol oxsidase aktiviti dalam tisu tumbuhan pelbagai jangkitan berikut oleh pelbagai pathogen. Penyelidikan kini telah dijalankan bertujuan mengkaji perubahan dalam selulase, pectinase, peroxidase dan polifenol oksidase semasa pathogenesis yang berada didalam gaharu.

Inokulasi buatan pencilan kulat-kulat terpencil digunakan (chaetomium globosum kunze dan fusarium oxysporum schlecht) kombinasi gambungan kulat-kulat diamalkan sebagai jangkitan inokulasi buatan. Pectinase aktiviti telah dikaji ditentukan campuran tindak balas daripada 1% pertin dan 1 Ml enymemeng ekstrak.

Satu unit enzim adalah dinyatakan akan kehilangan 1% daripada kelikatan selepas 30 minit bila terdedah, peroxidase telah diekstrak melalui keadah berikut dan akitiiti polifenol oxsidase digunakan, catechol adalah sebagai aktiviti substrat selulase dan pectinase. Penyelidik melaporkan bahawa aktiviti enzim pectolytic dan aktiviti cellulolytic telah diperingkatkan kerana dipengaruhi Aspergillus flavus dan mencadangkan pengunaan lebih tinggi peratus daripada enzim pectolytic dan cellulolytic sebagai alat pembiakkan kulat kerana enzim bertanggungjawab sebagai kerosakan sel-sel yang temui pada buah coccinia reput.

Penemuan peningkatan aktiviti kedua-dua enzim setelah disuntik mampu mengawal kestabilan. Aktiviti peroxidase dalam tumbuh-tumbuhan yang dijangkiti kemungkinan menjadi salah satu penyebab akibat kerosakan akan lebih besar mengandungi karbohidrat melalui monophosphate  kerana sebatian yang dihasilkan, dioksidakan oleh peroxidase  (H202) untuk mengatasi pathogen.

Saya kongsikan serba sedikit ilmu yang saya perolehi daripada test kajian awal saya mengenai spesis kulat, serangan palesit, factor kereputan, benteng pertahanan dan serangan kulat yang ada hubungkait dengan pembentukan gaharu. Kemungkinan terdapat percanggahan dari maklumat ini atau anggapan maklumat kurang tepat, ianya tidak dapat dielakkan dan kita harus fahami, seperti kata pribahasa lain padang lain belalang. TQ.

Pengaktifan Kulat-Kulat

Telah masuk ke minggu kedua kita berada dalam suasana perintah kawalan pengerakan (PKP) kerana bencana COVID 19 yang melanda diseluruh dunia dan disambung 14 hari sehingga 14 april 2020. Banyak peristiwa penting berlaku bermula awal masuk tahun 2020 dan semuga kita tabah, terima ujian Allah ini dengan penuh kesabaran. Pada rakan-rakan, sahabat-sahabat, jiran-jiran kita dan amnya rakyat Malaysia yang ada ahli keluarga terkena jangkitan, sama-sama kita doakan agar mereka disembuhkan dan pada yang kehilangan ahli keluarga kerana COVID 19, kita ucapkan tarziah dan sama sedekah AL’fatihah.

Hari ini ada kesempatan membelek-belek buku-buku kajian awal mengenai pembentukan gaharu melalui teknologi dan sepanjang hari mengedit serba sikit ayat agar mudah difahami. Maklumat ini agak lama tersimpan, jika dibiarkan tanpa ada disalurkan sebagai satu maklumat, ianya pasti tidak nilai apa-apa hanya sebuah buku buruk yang dipenuhi habuk-habuk. Saya bagi tajuk sendiri maklumat ini dan ada beberapa tajuk saya kongsikan, antaranya mengaktifan kuat-kulat, Aktiviti anti mikrob, Gaharu Micrologi dan Aktiviti enzim-gaharu (Patogenesis) dan Aktiviti Peroxidase.

Mekanisme tindak balas pertahanan yang seterusnya mendorong pembentukan biosintensis bahan-bahan pertahanan seperti sesquiterpenes dalam parenchyma sel-sel. Phytoalexins terkumpul dan dirembeskan ke dalam salur-salur bersebelahan melalui tisu-tisu (kapal)-parenchymal, mengakibatkan pembentukan halangan, iaitu, vessel occlusions. Kedua-dua occlusions dan sesguiterpenes mungkin menyumbang kepada sekatan fizikal dan kimia perencatan mikrob dalam batang, akibatnya sebagai mengalakkan pembiakkan mereka. Bilangan  occlusions (kapal) dengan jumlah sesquiterpenes meningkat bersama tempuh masa jangkitan, akhir membawa kepada pembentukan gaharu pada Aquilaria spp.

Berdasarkan hipotensis ini, akvititi anti-kulat minyak pati diperolehi daripada gaharu berasal dari F, W, dan H, dan adalah dinilai berdasarkan L.theobromae  (agen biologi gaharu induksi), F.oxysporum (pathogen tumbuhan) dan C. albicans (kulat klinikal). Aktiviti anti-kulat  daripada tiga minyak pati (gaharu liar) W, didorong oleh kulat (F) dan pokok-pokok yang sihat dengan pokok tanpa mikoriza (H) telah dinilai dengan keadah penyebaran “agar”, seperti yang dilakukan, minyak pati F dan W, telah berlaku terhadap strain kulat seperti yang diuji, walau bagaimanapun, H menunjukkan aktiviti anti-kulat terlalu lemah.

Laporan pertama mengenai anti-kulat melalui aktiviti strain thyee fungal minyak pati dikalangan Aquilaria spp, minyak pati menunjukkan mempunyai anti-bacteria terhadap anti-methicillin tahan staphylococcus aureus (MRSA), S. aureus dan bacillus subtilis, tidak berkesan pada E-coli pada kepekatan kajian dari kajian maksimun, menunjukkan bahawa etil acetate- pecahan larut ekstrak gaharu yang berasal dari minyak pati.

Aquilaria spp menunjukkan aktiviti anti-kulat yang kuat terhadap Fusarium solani (ejen biologi induksi gaharu) didapati, bahawa minyak pati gaharu (aquilaria spp) mempunyai anti-mikrob terhadap C. albicans, dalam kajian, nilai-nilai MIC daripada minyak pati berasal dari F dan W pada C. albicans nisbah adalah 0.5 mg – Ml-1.

Pengetahuan tradisional digalakkan untuk membuat pemuliharaan dan pembangunan lebih relevan dan diterima secara social, ditunjukkan untuk memainkan peranan penting mengenai pembangunan keperluan penyelidikan kritikal ekologi tropika botani, perhutanan dan phytochemists dan lain-lain berkaitan. Para-para pengusaha telah berusaha selama beberapa dekad untuk memahami lakukan kajian proses pembentukkan resin pada spesies Aquilaria spp. Pada pokok hutan tropika di asia selatan dan asia tenggara.

Melalui kajian penyelidikkan saintifik, tidak semua spesies Aquilaria menghasilkan gaharu serta pembentukan gaharu masih kurang difahami, pelbagai-bagai percubaan di lakukan termasuk menyemai aromatic, suntikan tetapi pembentukan tiada serata berkesanan pada pokok dan boleh dianggap kajian penyelidikan ini ada lah terbaik. Sebahagian besar masih mampu terbentuk gaharu secara semula jadi dan teknik inokulasi melalui semaian spesies kulat tertentu, ianya boleh mengelakkan kepupusan spesis Aquilaria spp, setelah aktiviti perladangan sebagai gantian pokok –pokok liar yang semakin pupus.

Perbandingan pengetahuan saintifik dan pengetahuan tradisional orang asli dan pengumpul produk hutan lain, dari Negara di Asia selatan dan Asia tenggara amnya, pengurusannya terhad sehingga boleh dikatakan gagal membekalkan gaharu sejumlah yang besar, melalui penanaman, didapati bahawa kaum orang asli mengiktiraf ekologi kompleks pembentukkan resin yang melibatkan dua factor atau mungkin tiga, organisma pokok-hidup, satu atau terlebih jangkitan kulat dan mungkin serangga sebagai perantaraan.

Pembangunan satu sistem pengeluaran secara meluas bagi sumber ini, memerlukan kefahaman yang jelas tentang bagaimana pelbagai-bagai elemen semula jadi berfungsi secara beransingan dan secara sinergi. Pengetahuan tradisional mampu membantu mengisi jurang menambah pangkalan maklumat dan mengenal pasti bidang sebagai maklumat tambah untuk kajian-kajian penyelidikkan akan datang, laporan-laporan penyelidikan ada setelah boleh dianggap sebagai jurang perbezaan pendapat. Tetapi. boleh menyokong sebagai pengetahuan asas, akan menjadi peranan besar untuk melakukan penyelidikan ethnobiological boleh digambungkan, terutamanya antara ethnobiological dan perhutanan dalam membangunkan sistem pengurusan yang mantap bagi sumber tradisional dan habitat semula jadi.

Aktiviti anti mikrob :- Kajian telah menunjukkan spesies kulat, seperti Aspergilus sp. Botrydiplodia sp. (Lasiodiplodia sp.) Diplodia sp. Fusarium bulbiferum. F. laterium. F. oxysporum. Penicillium sp. Pythium sp. Trichoderma sp. Kebiasaanya menjangkiti spesies Aquilaria melalui patologi dan bukan patologi. Sample yang dikaji di ambil daripada pokok sihat boleh menghasilkan sehingga 49% asid hexadecanoic serta sesquiterpernes yang menyumbang 8.4%.

Ejen gaharu sebab-musabab boleh dibahagikan kepada fisikal, kimia dan agen biologi, daripada ketiga-tiga agen, yang keadah biologi inokulasi gaharu, dengan mengunakan kulat, adalah digalakkan kerana menyebabkan pembangunan progresif gaharu. Yang paling berkesan beberapa pencilan dalam pembentukkan gaharu telah diuji dengan meniru proses semula jadi, walau terdapat ada laporan kualiti gaharu disebabkan induksii kulat. Untuk pengetahuan, laporan pertama induksi kulat-(inokulasi) berjaya mengeluarkan 34% sesquiterpenes dan 4% sebatian aromatic dan pembentukan pada Aquilaria, dengan ulasan bahawa mekanisme petahanan tumbuhan pembentukannya di sebabkan terhasilnya gaharu.

Gaharu Micrologi:- Pelbagai-bagai kulat yang berkaitan dengan pembentukan gaharu dikaitkan, tetapi, ianya masih dalam kajian tidak dipastikan adakah jangkitan dan pembentukan gaharu telah menjadi satu proses boleh dianggap agak pelahan. Dari penyelidikan mengatakan bahawa pokok-pokok  sekurang-kurang berusia 50 tahun menghasilkan jumlah besar oleoresin gaharu, setelah diasingkan para saintis imperfecti kulat dan kayu dijangkiti pada Aquilaria spp, ulasan mengatakan bahawa Torula sp, diasingkan, disuntik ke batang aqiuilaria spp. tetapi, ekperimen ini telah ditinggalkan pada tahun 1931, disebabkan pencemaran inokulasi, kajian ini dilanjutkan oleh pengkaji yang terlibat menemui kejayaan pengunaan Cladosporum, kamudian di abaikan, kerana kajian ini tidak menghasilkan keputusan positive.

Berikut daripada kajian penyelidikan (1952) telah mengasingkan Epicoccom granulatum daripada kayu yang telah dijangkiti, kemungkinan bahawa pembentukkan gaharu disebabkan oleh aktiviti-kulat dan prospek disengajakan menjangkit pokok melalui agen penyebab, aktiviti matlamat ini amat popular dikalangan penburu gaharu, tetapi masih bercanggahan pendapat di antara mereka, tetapi tetap menyokong bahawa ejen berjangkit adalah kulat pathogen.

Tahun 1977, Philiophora parasitica dikenal pasti oleh para pengkaji,  laporan mengatakan peronggaan lingkaran dinding tracheid daripada organisma kayu Aquilaria spp. menunjukkan bahawa kulat yang paling kerap temui ketika diasingkan merangkumi Pencillium ciitrinum, Aspergillus tamani dan Aspergillus spp  termasuk Fusarium solani, Botryadplodie theobromea dan lain-lain kulat tiada dikenali, tetapi terdapat beberapa laporan mengatakan bahawa Phialophore parasitica sering dikaitkan dengan bahagian-bahagian tertentu pada Aquilaria spp. mempu menghasilkan gaharu berkualiti.

Pembentukan gaharu jarang-jarang ditemui pada pokok berusia 25 ke bawah (teori), jika ditemui mungkin ianya melalui kecederaan pada pokok, sebagai contoh disebabkan ribut dan patah, ianya diserang jangkitan kulat, jika pokok dalam keadaan sihat, aquilaria spp berusia seusia ini, tiada oleoresin wangi akan ditemui tetapi apabila teknik tradisional memotong, takik pada batang, oleoresin mula menyelia bahagian-bahagian terluka dan akan terdedah pada jangkitan kulat.

Kulat Cytosphaera mangiferae diasingkan yang ditemui pada pokok mati berdiri, salah satu kulat menyerang pokok yang mati dalam keadaan mati berdiri, ianya dikenali mengenal pasti empat spesies kulat lain yang berkaitan dengan aquilaria spp. (Aspergillus sp. Fusarium sp. Penicililium sp dan Epicoccum sp). Pada tahun 2000 pengkaji mengenal pasti dua budaya kulat di temui pada kayu berpenyakit  Fusarium oxysporum schlect dan chaetum globosum kunze, dan telah berjaya lakukan inokulasi pada pokok sihat tujuan pertumbuhan koloni akan berlaku.

Dari tahun 1991 para saintis India berjaya melakukan keadah jangkitan, telah memulakan program jangkitan tiruan ini di pokok aquilaria yang ditanam diladang, dari kajian,  penemuan ini tidak meninggalkan kesan alam sekitar atau sosial di temui, selamat diguna pakai, cuma terdapat kebimbangan permintaan pada komoditi gaharu semula jadi, tetapi, pengeluaran gaharu inokulasi akan meningkat mampu membantu permintaan global.

Aktiviti enzim-gaharu (Patogenesis) :- Aktiviti selulase, pectinase, peroxidase dan polifenol oksidase ditentukan pada pokok dalam keadaan sihat, pada bahagian tumbuhan semula jadi yang dijangkiti dan disuntik secara bersilang, sebagai kajian perubahan dalam aktiviti-aktiviti enzim sebagai patogenis. Sample yang dijangkiti secara semula jadi dengan chaetomium globosum dan fusarium oxysporum dipamerkan didapati lebih tinggi aktiviti enzim berbanding sampel yang sihat.

Keluarga Thymalaeaceae mengandungi oleoresin wangi ini, juga dikenali sebagai “agar”, Agar atau gaharu dianggap sebagai produk patologi yang dihasilkan oleh serangan kulat (atau kayu dijangkit), sebilangan besar para penyelidik melaporkan pembentukkan “agar” dan dilaporkan bahawa zon “agar” berkaitan dengan acuan dan kulat yang mereput kayu. Antara spesies kulat yang berbeza-beza dikaitkan dengan zon “agar”, telah mempamerkan pathogenesis, manakala yang lain seolah-olah hanya saprophytic, antara salah satu gejala-gejala yang ditemui dalam penyakit disebabkan kulat adalah tidak terurus pada tisu kayu yang dibawa oleh enzim yang diserapkan melalui pathogen ketika menyerang luka-luka pada pokok.

Perubahan dalam cellulolytic dan pectinolytic aktiviti enzim dalam pathogenesis mengikut kajian (1988), peningkatan dalam peroxidase dan polifenol oxsidase aktiviti dalam tisu tumbuhan pe;bagai jangkitan berikut oleh pelbagai pathogen (1961-1972). Penyelidikan kini telah dijalankan bertujuan mengkaji perubahan dalam selulase, pectinase, peroxidase dan polifenol oksidase semasa patogenasis yang berada didalam gaharu. Inokulasi buatan pencilan kulat-kulat terpencil digunakan (chaetomium globosum kunze dan fusarium oxysporum schlecht) kombinasi gambungan kulat-kulat diamalkan sebagai jangkitan inokulasi buatan. Pectinase aktiviti telah dikaji ditentukan campuran tindak balas daripada 1% pertin dan 1 Ml enymemeng ekstrak (1975).

Satu unit enzim adalah dinyatakan akan kehilangan 1% daripada kelikatan selepas 30 minit bila terdedah, peroxidase telah diekstrak melalui keadah berikut (1979) dan akitiiti polifenol oxsidase (1978) dgunakan (1979), catechol adalah sebagai aktiviti substrat selulase dan pectinase.

Aktiviti Peroxidase :- Pada sample yang sihat tiada perubahan ditemui setelah 40 hari pengeraman, catatan tertinggi pada kayu (0.077) dijangkiti dan paling rendah pada kayu sihat (0.052). Aktiviti oxidase polifenol berada dalam sample kayu sihat, aktiviti polifenol oxsidase tiada meningkat dengan ketara dengan ukuran pemanjangan pengeraman, walau bagaimana pun peningatan besar ditemui dalam polifenol ketika aktiviti oxidase diperhatikan semasa dijangkiti pada sample dengan penambahan tempoh pengeraman.

Aktiviti tertentu adalah maksimum nisbah (0.119) berada pada kayu semula jadi, yang telah dijangkiti dan minimum (0.052) berada dalam kayu sihat. Kajian penyelidikan menunjukkan bahawa semua rawatan menunjukkan kedua-dua enzim ini tempoh hari ke 20 pengeraman.

Manakala pada hari ke 30 dan hari ke 40 pengeraman, aktiviti-aktiviti kedua-dua enzim agak berkurangan. Oleh itu, selulase yang berada tahaf kertinggian aktviiti pectinase diperhatikan semasa menjangkiti kayu kemungkinan bertanggung jawab mengurus secara tiada stabil pada tisu kayu, yang membawa kepada penjajahan pathogen, berlaku perubahan semasa aktiviti benih enzim kiri dan kanan pada kayu sihat. TQ.