Pengaktifan Kulat-Kulat

Telah masuk ke minggu kedua kita berada dalam suasana perintah kawalan pengerakan (PKP) kerana bencana COVID 19 yang melanda diseluruh dunia dan disambung 14 hari sehingga 14 april 2020. Banyak peristiwa penting berlaku bermula awal masuk tahun 2020 dan semuga kita tabah, terima ujian Allah ini dengan penuh kesabaran. Pada rakan-rakan, sahabat-sahabat, jiran-jiran kita dan amnya rakyat Malaysia yang ada ahli keluarga terkena jangkitan, sama-sama kita doakan agar mereka disembuhkan dan pada yang kehilangan ahli keluarga kerana COVID 19, kita ucapkan tarziah dan sama sedekah AL’fatihah.

Hari ini ada kesempatan membelek-belek buku-buku kajian awal mengenai pembentukan gaharu melalui teknologi dan sepanjang hari mengedit serba sikit ayat agar mudah difahami. Maklumat ini agak lama tersimpan, jika dibiarkan tanpa ada disalurkan sebagai satu maklumat, ianya pasti tidak nilai apa-apa hanya sebuah buku buruk yang dipenuhi habuk-habuk. Saya bagi tajuk sendiri maklumat ini dan ada beberapa tajuk saya kongsikan, antaranya mengaktifan kuat-kulat, Aktiviti anti mikrob, Gaharu Micrologi dan Aktiviti enzim-gaharu (Patogenesis) dan Aktiviti Peroxidase.

Mekanisme tindak balas pertahanan yang seterusnya mendorong pembentukan biosintensis bahan-bahan pertahanan seperti sesquiterpenes dalam parenchyma sel-sel. Phytoalexins terkumpul dan dirembeskan ke dalam salur-salur bersebelahan melalui tisu-tisu (kapal)-parenchymal, mengakibatkan pembentukan halangan, iaitu, vessel occlusions. Kedua-dua occlusions dan sesguiterpenes mungkin menyumbang kepada sekatan fizikal dan kimia perencatan mikrob dalam batang, akibatnya sebagai mengalakkan pembiakkan mereka. Bilangan  occlusions (kapal) dengan jumlah sesquiterpenes meningkat bersama tempuh masa jangkitan, akhir membawa kepada pembentukan gaharu pada Aquilaria spp.

Berdasarkan hipotensis ini, akvititi anti-kulat minyak pati diperolehi daripada gaharu berasal dari F, W, dan H, dan adalah dinilai berdasarkan L.theobromae  (agen biologi gaharu induksi), F.oxysporum (pathogen tumbuhan) dan C. albicans (kulat klinikal). Aktiviti anti-kulat  daripada tiga minyak pati (gaharu liar) W, didorong oleh kulat (F) dan pokok-pokok yang sihat dengan pokok tanpa mikoriza (H) telah dinilai dengan keadah penyebaran “agar”, seperti yang dilakukan, minyak pati F dan W, telah berlaku terhadap strain kulat seperti yang diuji, walau bagaimanapun, H menunjukkan aktiviti anti-kulat terlalu lemah.

Laporan pertama mengenai anti-kulat melalui aktiviti strain thyee fungal minyak pati dikalangan Aquilaria spp, minyak pati menunjukkan mempunyai anti-bacteria terhadap anti-methicillin tahan staphylococcus aureus (MRSA), S. aureus dan bacillus subtilis, tidak berkesan pada E-coli pada kepekatan kajian dari kajian maksimun, menunjukkan bahawa etil acetate- pecahan larut ekstrak gaharu yang berasal dari minyak pati.

Aquilaria spp menunjukkan aktiviti anti-kulat yang kuat terhadap Fusarium solani (ejen biologi induksi gaharu) didapati, bahawa minyak pati gaharu (aquilaria spp) mempunyai anti-mikrob terhadap C. albicans, dalam kajian, nilai-nilai MIC daripada minyak pati berasal dari F dan W pada C. albicans nisbah adalah 0.5 mg – Ml-1.

Pengetahuan tradisional digalakkan untuk membuat pemuliharaan dan pembangunan lebih relevan dan diterima secara social, ditunjukkan untuk memainkan peranan penting mengenai pembangunan keperluan penyelidikan kritikal ekologi tropika botani, perhutanan dan phytochemists dan lain-lain berkaitan. Para-para pengusaha telah berusaha selama beberapa dekad untuk memahami lakukan kajian proses pembentukkan resin pada spesies Aquilaria spp. Pada pokok hutan tropika di asia selatan dan asia tenggara.

Melalui kajian penyelidikkan saintifik, tidak semua spesies Aquilaria menghasilkan gaharu serta pembentukan gaharu masih kurang difahami, pelbagai-bagai percubaan di lakukan termasuk menyemai aromatic, suntikan tetapi pembentukan tiada serata berkesanan pada pokok dan boleh dianggap kajian penyelidikan ini ada lah terbaik. Sebahagian besar masih mampu terbentuk gaharu secara semula jadi dan teknik inokulasi melalui semaian spesies kulat tertentu, ianya boleh mengelakkan kepupusan spesis Aquilaria spp, setelah aktiviti perladangan sebagai gantian pokok –pokok liar yang semakin pupus.

Perbandingan pengetahuan saintifik dan pengetahuan tradisional orang asli dan pengumpul produk hutan lain, dari Negara di Asia selatan dan Asia tenggara amnya, pengurusannya terhad sehingga boleh dikatakan gagal membekalkan gaharu sejumlah yang besar, melalui penanaman, didapati bahawa kaum orang asli mengiktiraf ekologi kompleks pembentukkan resin yang melibatkan dua factor atau mungkin tiga, organisma pokok-hidup, satu atau terlebih jangkitan kulat dan mungkin serangga sebagai perantaraan.

Pembangunan satu sistem pengeluaran secara meluas bagi sumber ini, memerlukan kefahaman yang jelas tentang bagaimana pelbagai-bagai elemen semula jadi berfungsi secara beransingan dan secara sinergi. Pengetahuan tradisional mampu membantu mengisi jurang menambah pangkalan maklumat dan mengenal pasti bidang sebagai maklumat tambah untuk kajian-kajian penyelidikkan akan datang, laporan-laporan penyelidikan ada setelah boleh dianggap sebagai jurang perbezaan pendapat. Tetapi. boleh menyokong sebagai pengetahuan asas, akan menjadi peranan besar untuk melakukan penyelidikan ethnobiological boleh digambungkan, terutamanya antara ethnobiological dan perhutanan dalam membangunkan sistem pengurusan yang mantap bagi sumber tradisional dan habitat semula jadi.

Aktiviti anti mikrob :- Kajian telah menunjukkan spesies kulat, seperti Aspergilus sp. Botrydiplodia sp. (Lasiodiplodia sp.) Diplodia sp. Fusarium bulbiferum. F. laterium. F. oxysporum. Penicillium sp. Pythium sp. Trichoderma sp. Kebiasaanya menjangkiti spesies Aquilaria melalui patologi dan bukan patologi. Sample yang dikaji di ambil daripada pokok sihat boleh menghasilkan sehingga 49% asid hexadecanoic serta sesquiterpernes yang menyumbang 8.4%.

Ejen gaharu sebab-musabab boleh dibahagikan kepada fisikal, kimia dan agen biologi, daripada ketiga-tiga agen, yang keadah biologi inokulasi gaharu, dengan mengunakan kulat, adalah digalakkan kerana menyebabkan pembangunan progresif gaharu. Yang paling berkesan beberapa pencilan dalam pembentukkan gaharu telah diuji dengan meniru proses semula jadi, walau terdapat ada laporan kualiti gaharu disebabkan induksii kulat. Untuk pengetahuan, laporan pertama induksi kulat-(inokulasi) berjaya mengeluarkan 34% sesquiterpenes dan 4% sebatian aromatic dan pembentukan pada Aquilaria, dengan ulasan bahawa mekanisme petahanan tumbuhan pembentukannya di sebabkan terhasilnya gaharu.

Gaharu Micrologi:- Pelbagai-bagai kulat yang berkaitan dengan pembentukan gaharu dikaitkan, tetapi, ianya masih dalam kajian tidak dipastikan adakah jangkitan dan pembentukan gaharu telah menjadi satu proses boleh dianggap agak pelahan. Dari penyelidikan mengatakan bahawa pokok-pokok  sekurang-kurang berusia 50 tahun menghasilkan jumlah besar oleoresin gaharu, setelah diasingkan para saintis imperfecti kulat dan kayu dijangkiti pada Aquilaria spp, ulasan mengatakan bahawa Torula sp, diasingkan, disuntik ke batang aqiuilaria spp. tetapi, ekperimen ini telah ditinggalkan pada tahun 1931, disebabkan pencemaran inokulasi, kajian ini dilanjutkan oleh pengkaji yang terlibat menemui kejayaan pengunaan Cladosporum, kamudian di abaikan, kerana kajian ini tidak menghasilkan keputusan positive.

Berikut daripada kajian penyelidikan (1952) telah mengasingkan Epicoccom granulatum daripada kayu yang telah dijangkiti, kemungkinan bahawa pembentukkan gaharu disebabkan oleh aktiviti-kulat dan prospek disengajakan menjangkit pokok melalui agen penyebab, aktiviti matlamat ini amat popular dikalangan penburu gaharu, tetapi masih bercanggahan pendapat di antara mereka, tetapi tetap menyokong bahawa ejen berjangkit adalah kulat pathogen.

Tahun 1977, Philiophora parasitica dikenal pasti oleh para pengkaji,  laporan mengatakan peronggaan lingkaran dinding tracheid daripada organisma kayu Aquilaria spp. menunjukkan bahawa kulat yang paling kerap temui ketika diasingkan merangkumi Pencillium ciitrinum, Aspergillus tamani dan Aspergillus spp  termasuk Fusarium solani, Botryadplodie theobromea dan lain-lain kulat tiada dikenali, tetapi terdapat beberapa laporan mengatakan bahawa Phialophore parasitica sering dikaitkan dengan bahagian-bahagian tertentu pada Aquilaria spp. mempu menghasilkan gaharu berkualiti.

Pembentukan gaharu jarang-jarang ditemui pada pokok berusia 25 ke bawah (teori), jika ditemui mungkin ianya melalui kecederaan pada pokok, sebagai contoh disebabkan ribut dan patah, ianya diserang jangkitan kulat, jika pokok dalam keadaan sihat, aquilaria spp berusia seusia ini, tiada oleoresin wangi akan ditemui tetapi apabila teknik tradisional memotong, takik pada batang, oleoresin mula menyelia bahagian-bahagian terluka dan akan terdedah pada jangkitan kulat.

Kulat Cytosphaera mangiferae diasingkan yang ditemui pada pokok mati berdiri, salah satu kulat menyerang pokok yang mati dalam keadaan mati berdiri, ianya dikenali mengenal pasti empat spesies kulat lain yang berkaitan dengan aquilaria spp. (Aspergillus sp. Fusarium sp. Penicililium sp dan Epicoccum sp). Pada tahun 2000 pengkaji mengenal pasti dua budaya kulat di temui pada kayu berpenyakit  Fusarium oxysporum schlect dan chaetum globosum kunze, dan telah berjaya lakukan inokulasi pada pokok sihat tujuan pertumbuhan koloni akan berlaku.

Dari tahun 1991 para saintis India berjaya melakukan keadah jangkitan, telah memulakan program jangkitan tiruan ini di pokok aquilaria yang ditanam diladang, dari kajian,  penemuan ini tidak meninggalkan kesan alam sekitar atau sosial di temui, selamat diguna pakai, cuma terdapat kebimbangan permintaan pada komoditi gaharu semula jadi, tetapi, pengeluaran gaharu inokulasi akan meningkat mampu membantu permintaan global.

Aktiviti enzim-gaharu (Patogenesis) :- Aktiviti selulase, pectinase, peroxidase dan polifenol oksidase ditentukan pada pokok dalam keadaan sihat, pada bahagian tumbuhan semula jadi yang dijangkiti dan disuntik secara bersilang, sebagai kajian perubahan dalam aktiviti-aktiviti enzim sebagai patogenis. Sample yang dijangkiti secara semula jadi dengan chaetomium globosum dan fusarium oxysporum dipamerkan didapati lebih tinggi aktiviti enzim berbanding sampel yang sihat.

Keluarga Thymalaeaceae mengandungi oleoresin wangi ini, juga dikenali sebagai “agar”, Agar atau gaharu dianggap sebagai produk patologi yang dihasilkan oleh serangan kulat (atau kayu dijangkit), sebilangan besar para penyelidik melaporkan pembentukkan “agar” dan dilaporkan bahawa zon “agar” berkaitan dengan acuan dan kulat yang mereput kayu. Antara spesies kulat yang berbeza-beza dikaitkan dengan zon “agar”, telah mempamerkan pathogenesis, manakala yang lain seolah-olah hanya saprophytic, antara salah satu gejala-gejala yang ditemui dalam penyakit disebabkan kulat adalah tidak terurus pada tisu kayu yang dibawa oleh enzim yang diserapkan melalui pathogen ketika menyerang luka-luka pada pokok.

Perubahan dalam cellulolytic dan pectinolytic aktiviti enzim dalam pathogenesis mengikut kajian (1988), peningkatan dalam peroxidase dan polifenol oxsidase aktiviti dalam tisu tumbuhan pe;bagai jangkitan berikut oleh pelbagai pathogen (1961-1972). Penyelidikan kini telah dijalankan bertujuan mengkaji perubahan dalam selulase, pectinase, peroxidase dan polifenol oksidase semasa patogenasis yang berada didalam gaharu. Inokulasi buatan pencilan kulat-kulat terpencil digunakan (chaetomium globosum kunze dan fusarium oxysporum schlecht) kombinasi gambungan kulat-kulat diamalkan sebagai jangkitan inokulasi buatan. Pectinase aktiviti telah dikaji ditentukan campuran tindak balas daripada 1% pertin dan 1 Ml enymemeng ekstrak (1975).

Satu unit enzim adalah dinyatakan akan kehilangan 1% daripada kelikatan selepas 30 minit bila terdedah, peroxidase telah diekstrak melalui keadah berikut (1979) dan akitiiti polifenol oxsidase (1978) dgunakan (1979), catechol adalah sebagai aktiviti substrat selulase dan pectinase.

Aktiviti Peroxidase :- Pada sample yang sihat tiada perubahan ditemui setelah 40 hari pengeraman, catatan tertinggi pada kayu (0.077) dijangkiti dan paling rendah pada kayu sihat (0.052). Aktiviti oxidase polifenol berada dalam sample kayu sihat, aktiviti polifenol oxsidase tiada meningkat dengan ketara dengan ukuran pemanjangan pengeraman, walau bagaimana pun peningatan besar ditemui dalam polifenol ketika aktiviti oxidase diperhatikan semasa dijangkiti pada sample dengan penambahan tempoh pengeraman.

Aktiviti tertentu adalah maksimum nisbah (0.119) berada pada kayu semula jadi, yang telah dijangkiti dan minimum (0.052) berada dalam kayu sihat. Kajian penyelidikan menunjukkan bahawa semua rawatan menunjukkan kedua-dua enzim ini tempoh hari ke 20 pengeraman.

Manakala pada hari ke 30 dan hari ke 40 pengeraman, aktiviti-aktiviti kedua-dua enzim agak berkurangan. Oleh itu, selulase yang berada tahaf kertinggian aktviiti pectinase diperhatikan semasa menjangkiti kayu kemungkinan bertanggung jawab mengurus secara tiada stabil pada tisu kayu, yang membawa kepada penjajahan pathogen, berlaku perubahan semasa aktiviti benih enzim kiri dan kanan pada kayu sihat. TQ.